Фиксирование и препаровка

Для морфологического исследования наиболее удобно хранить гусениц в 75°7м спирте. Перед помещением в спирт гусениц необходимо фиксировать кипящей водой. Для фиксации мелких гусениц (минеры, гусеницы первых возрастов) достаточно опустить их в кипяток и оставить там на короткий срок, без кипячения. Крупных гусениц следует выдержать 1—2 мин. в горячей воде, осторожно доводя ее до кипения. Кипячение мелких и среднего размера гусениц производят в химических пробирках; для очень крупных приходится брать химические стаканы или фарфоровые чашки.
Следует помнить, что фиксированная гусеница растягивается, поэтому точное измерение ее длины нужно делать до кипячения. Также до кипячения следует отметить положение головы по отношению к груди, так как втянутая голова после кипячения выдвигается из груди. В спирт лучше прибавлять глицерин, приблизительно 2 куб. см на 400 см 75°го спирта (1—2 чайных ложки в стакан спирта). Проваренные и фиксированные таким способом гусеницы очень удобны для изготовления препаратов приблизительно после месячного лежания в 75°м спирту, так как, будучи обработаны щелочью, они не требуют труда для удаления жирового тела; оно легко отделяется от кожи, и последняя получается совершенно чистой. Универсальных способов для сохранения окраски гусеницы, в особенности зеленой, до сего времени нет.
Спиртовой или фиксированный в других жидкостях материал рассматривают в той же жидкости, следя за тем, чтобы последняя покрывала всю гусеницу. Для рассматривания объект можно переносить из фиксирующей жидкости в жидкость такой же крепости или, еще лучше, в более слабый раствор, или просто в воду, но отнюдь не наоборот, так как в таком случае объект съеживается; это относится особенно к нежным гусеницам первой фазы. Рассматривают такие объекты под бинокуляром при сильном падающем свете. При отсутствии специального осветителя необходимо помещать между лампой и объектом колбу, наполненную водой. При рассматривании под бинокуляром гусеницу удобно закреплять энтомологическими булавками в маленьких чашках Коха, дно которых залито толстым слоем парафина. Волоски у мохнатых гусениц для лучшего рассмотрения бородавок можно остричь. Мелких гусениц удобно рассматривать в глицеринжелатине. Для этого их из спирта переносят на некоторое время в глицеринжелатин, затем гусеницу, смоченную спиртом, кладут на предметное стекло с комочком глицеринжелатина и, слегка подогрев, дают глицеринжелатину смешаться со спиртом; получаются долго сохраняющиеся и не съеживающиеся препараты.
Сухие надутые гусеницы исследуются прямо под бинокуляром.
Для изучения хетотаксии часто приходится прибегать к изготовлению специальных препаратов. Если гусеница не очень мала, ее разрезают тонкими ножницами вдоль всего тела по правому боку. После этого ее кипятят в 10—15%й щелочи (едкого кали или натра) до тех пор, пока мягкие ткани не отделятся от кожи; для этого достаточно кипятить от нескольких секунд до 1—2 мин., в зависимости от величины гусеницы. Вместо кипячения можно оставлять объект в щелочи на ночь. Очень хорошо действует щелочь при температуре в 25—30° в термостате. После мацерации объект тщательно промывается водой. Если материал фиксирован в 75°м спирте с предварительным провариванием в воде, то гусеницы, хорошо промытые сильной струей из пипетки, после этого не требуют очистки; необходимо лишь удалить трахеи. В некоторых случаях, однако, в особенности при иной фиксации, надо удалить после промывки оставшиеся куски жирового тела иглами и тонким пинцетом или лучше изготовленными из тонких энтомологических булавок маленькими крючками; еще лучше, если конец иглы расплющен в лопатку и уже потом загнут крючком. Чтобы приготовленная таким образом шкурка хорошо растянулась на стекле, следует делать скальпелем надрезы между особо сморщивающимися сегментами.
Очень мелких гусениц, которых ножницами оперировать нельзя, удается разрезать маленьким скальпелем: положив гусеницу на спинную или брюшную сторону (лучше на восковую или парафиновую пластинку), разрезают ее вдоль по середине или ближе к правой стороне, надавливая скальпелем и придерживая и подправляя иглой или тонким пинцетом. Если это не удается, приходится ее препаровать тонкими иглами; при этом обычно на одном экземпляре удается отпрепаровать лишь некоторые сегменты, а для изучения остальных приходится брать другой экземпляр. При обработке щелочью мелких гусениц нужно быть очень осторожным, чтобы в ней их не передержать, иначе кожа делается настолько нежной, что рвется при первом прикосновении иглы. В некоторых случаях лучше не употреблять щелочи, а очистить шкурку от жирового тела иглами.
Исследование гусениц целиком при рассматривании хетотаксии имеет то преимущество, что при нем не искажается взаимное расположение щетинок, чего трудно избежать при изготовлении препаратов из гусениц разрезанных, а затем не приходится тратить времени на изготовление препаратов. Но на целой гусенице часто нельзя рассмотреть всех щетинок, в особенности мелких, что без труда удается на препаратах.
Для подробного морфологического описания необходимо изготовление препарата. Конечно, еще лучше комбинировать оба способа. Если изготовленные препараты не собираются заделывать окончательно в канадский бальзам, то после изучения их хранят в пробирках, в смеси из спирта и глицерина (2 части спирта, 2 части воды и 1 часть глицерина).
Голову приходится выдерживать в щелочи дольше, и вообще очистка головы требует терпения, т. к. ткани трудно извлекаются, и нужно не повредить тентория. Можно рекомендовать промывку головы шприцем; игла его вставляется в затылочное отверстие, и струя воды вымывает все ткани, если они хорошо мацерированы щелочью. Крупные головы можно промывать из пипетки. Очистку головы производят, не отделяя головы от шкурки тела,'за последнюю удобно придерживать голову при промывании. При отделении головы от шкурки нужно не повредить переднего участка переднегруди. Сильно пигментированные головы полезно обработать диафанолом для децигментации, что делает щетинки более заметными. Чтобы удобнее рассматривать голову сбоку, ее приходится разрезать на три части, при этом фронтальная часть отделяется от боковых так, чтобы щетинки (Pi) остались при ней.
Для исследования ротовых органов их расчленяют. Сперва отделяют от черепной коробки комплекс из нижних челюстей и нижней губы; это легко удается, если разорвать черепную коробку с фронтальной стороны. Выделенный комплекс может рассматриваться целиком или, если необходимо, расчленяться дальше; особенно приходится выделять нижнюю губу для исследования подглоточника. Верхняя губа и жвалы отделяются от черепа без труда. В некоторых случаях при определении ограничиваются рассматриванием прядильного сосочка, который при навыке может быть выделен иглой без расчленения головы вообще.
Техника заделывания препаратов в данном случае ничем не отличается от общеизвестной техники заделывания хитиновых частей насекомых.
В некоторых случаях, когда необходимо исследовать или даже описать гусеницу только по одному экземпляру, который в дальнейшем необходимо воспитать до имаго, приходится прибегать к ее наркозу. Я пробовал усыплять гусениц в морилке уксусным эфиром до тех пор, пока они не перестанут двигаться; после этого их следует быстро вынуть из морилки и, не теряя времени, начать исследование. Некоторые гусеницы находятся почти без движения до получаса и дольше.
Если в течение этого срока изучение не закончено, процедуру можноповторить; повидимому, при известной осторожности, наркоз проходит для гусеницы без последствий.
Для единообразия при зарисовке гусениц, которое очень облегчает и ускоряет сравнение отдельных изображений, необходимо руководствоваться следующими правилами: головной конец гусеницы должен быть направлен в левую сторону, а спинная сторона — вверх. Сегменты груди помечаются римскими цифрами, сегменты брюшка — арабскими